寡核苷酸(Oligonucleotides)藥物也稱(chēng)小核酸藥物，是短鏈核苷酸總稱(chēng)，包括反義寡核苷酸(ASO)、小干擾RNA(siRNA)、微小RNA(miRNA)、核酸適配體(Aptamer)等。寡核苷酸藥物具有研發(fā)周期短、特異性強(qiáng)、高效性和長(zhǎng)效性等明顯性優(yōu)勢(shì)，廣泛應(yīng)用于腫瘤、遺傳性疾病、心血管疾病、新陳代謝等多個(gè)疾病領(lǐng)域。針對(duì)寡核苷酸藥物下游純化特點(diǎn)，賽分科技推薦強(qiáng)陰離子交換填料：高分辨率Proteomix POR15-HQ，廣適型Proteomix POR30-HQ和低壓型Proteomix POR45-HQ，多種粒徑滿足不同樣品需求，助力于寡核苷酸藥物純化。

　　技術(shù)參數(shù)

　　應(yīng)用案例

　　某siRNA樣品，分別用Proteomix POR15-HQ、進(jìn)口品牌A、Proteomix POR30-HQ和Proteomix POR45-HQ進(jìn)行純化，檢測(cè)幾款不同填料的純化性能。

　　樣品類(lèi)型：某siRNA樣品

　　分子量：8 KD

　　純度：78.7%

　　上樣載量：10 mg/mL

　　層析柱：Proteomix POR15-HQ、進(jìn)口品牌A、Proteomix POR30-HQ和Proteomix POR45-HQ (6.6×100mm，CV=3.42 mL)

　　圖1. Proteomix POR15-HQ與進(jìn)口品牌A純化及HPLC分析圖譜

　　相同實(shí)驗(yàn)條件下，Proteomix POR15-HQ與進(jìn)口品牌A的純化效果相當(dāng)，洗脫合樣純度分別為95.8%和95.1%，回收率分別為95.7%與93.8%，Proteomix POR15-HQ略佳于品牌A。

　　圖2. Proteomix POR30-HQ純化及HPLC分析圖譜

　　圖3. Proteomix POR45-HQ純化及HPLC分析圖譜

　　由以上的純化結(jié)果可知，四款填料的洗脫合樣純度都在95%以上，控制單雜含量均小于1%，回收率均高于80%，均達(dá)到實(shí)際生產(chǎn)需求。Proteomix POR15-HQ與進(jìn)口品牌A純化性能一致且略佳;Proteomix POR30-HQ可滿足實(shí)際應(yīng)用中的多種樣品需求，具有較好的廣適性;對(duì)于中低壓設(shè)備、非防爆車(chē)間無(wú)法使用有機(jī)溶劑等情況，推薦使用Proteomix POR45-HQ。

　　反相層析

　　陰離子層析通用性強(qiáng)、成本低且分辨率高，通常為寡核苷酸純化的第一選擇，隨核苷酸鏈長(zhǎng)逐漸增加，相關(guān)雜質(zhì)的去除難度越大，在陰離子無(wú)法滿足需求的情況下，可選擇保留端基DMT方式，采用反相模式純化。反相層析具備高分辨率優(yōu)勢(shì)，在填料選擇上，以高分辨率硅膠反相填料為主，賽分科技推薦C18填料，高載量，高選擇性和分離效率，使純化后的樣品純度及N-X、P=O等關(guān)鍵性指標(biāo)的控制上滿足要求。PolyRP聚合物反相填料因其耐堿性優(yōu)勢(shì)也可用于寡核苷酸藥物純化。

　　表1. C18填料和PolyRP-10-300填料的技術(shù)參數(shù)

　　應(yīng)用案例

　　圖4. Bio-C18純化某ASO樣品純化圖譜

　　訂購(gòu)信息

　　互動(dòng)有禮

　　如需以上填料，掃描下圖二維碼，填寫(xiě)問(wèn)卷信息申請(qǐng)?jiān)囉醚b測(cè)試，并可參與抽獎(jiǎng)活動(dòng)。